Градиентная центрифуга плотности (isodensity centrifugation method) также известна как зональная центрифуга.

МетодпреимуществоМожно одновременно разделить несколько или все компоненты образца, иметь хорошее разрешение, эффект разделения хороший, можно получить более чистые компоненты за один раз.

НедостаткиЭто центробежное время дольше, необходимо подготовить градиентную жидкость, эксплуатационные требования высоки.

В соответствии с принципом центробежного разделения, градиент плотности центрифуги можно разделить нацентрифуга зоны скоростей(метод зональной центрифугации, R-Z) 和метод центрифугирования равноплотности (метод изопичной центрифугации).

Центрифугирование зоны скорости также можно назвать центрифугой равнозонной плотности, которая представляет собой центробежную сепарацию и очистку смешанных образцов в зависимости от различных размеров и коэффициентов осаждения различных компонентов частиц в образце.

При центрифугировании раствор образца, требующий разделения, помещается на градиентную колонну, образованную материалами с градиентом плотности (например, сахароза, хлорид цезия (CsCI), * и т.д.), плотность частиц образца должна быть больше плотности любой точки градиентной колонны, иначе идеальный зональный центробежный эффект не может быть получен. При центрифугировании различные компоненты смешанного образца образуют свои зоны в разных положениях градиентной колонны, выбирают подходящую скорость вращения и время для центрифугирования, заканчивают центрифугирование, когда каждая группа секций вытягивается далеко, а затем удаляют зону.Таким образом, компоненты смешанного образца могут быть отделены и очищены только одним центрифугированием, и их чистота и скорость восстановления отвечают требованиям.

преимуществоЭто отдельная очистка, разница в коэффициенте оседания компонентов более чем на 20% может быть выбран этот метод, высокая разрешающая способность, квалифицированная работа может отличать коэффициент оседания компонентов от 5% до 10% образцов хорошего разделения.

НедостаткиЭто условное ограничение материала, концентрация жидкости в образце не может быть слишком высокой, иначе условия работы трудно контролировать, в то же время этот метод по сравнению с дифференциальным центрифугированием, количество обрабатываемых образцов намного меньше.

Рисунок 1 Зона скоростей с центрифугой

Период центрифугирования зоны скорости должен строго контролироваться и не может быть слишком коротким, иначе зона образца не может быть четко пронесена, время не может быть слишком длинным, иначе компоненты, ожидающие разделения, могут погрузиться в дно. Скорость осаждения частиц образца, которые должны быть отделены, зависит от таких факторов, как форма, размер, плотность и центробежная сила частицы. Состояние образца до и после центрифугирования показано на рисунке 1.

Применение центробежной классики зоны скорости - это центрифуга с градиентом плотности тростникового сахара для очистки различных субклеточных аппаратов (рибосомы, митохондрии, эксосомы и т. Д.) и вирусных частиц (вирусных векторов, вакцин и т. Д.). Например, осаждение рибосомы 70S, которое мы получили в предыдущем периоде, после гидролиза может быть центрифугировано с помощью градиента плотности тростникового сахара, который дополнительно отделяет и очищает две субгруппы 50S и 30S. Конкретные экспериментальные процессы заключаются в следующем:

Центробежные классы в серии, продолжайте уделять внимание, чтобы узнать больше о центробежных методах!

Сосредоточьтесь на предыдущих классах

□Центробежные и относительные центробежные силы

□Коэффициент осаждения

□Экзоцентрифужный метод получения сыворотки

□Коэффициент K и время центрифугирования

□Правильно ли выбран метод разделения?

□Лабораторные проблемы стерилизации, торговый центр Little Bei 50%, чтобы решить!

* Номер утверждения: RA - 051 - cent - adv - ruo

* Дата пересмотра: 2020 / 10 / 16

:: Заявление: никакие изменения не могут быть внесены без разрешения, и Бекман Курт оставляет за собой право обновлять версию в любое время без уведомления