В ходе эксперимента, из - за различных свойств образца, только правильный метод центрифугирования был выбран, чтобы получить желаемый результат очистки разделения. Обычные методы центрифугирования в основном включают дифференциальный метод центрифугирования, градиент плотности центрифугирования. При этом метод центрифугирования с градиентом плотности можно подразделить на центробежный метод с зоной скорости с центрифугой и градиентом равной плотности. В этом выпуске подробно описан метод центрифугирования с разной скоростью.

дифференциальная центрифуга методом центрифугирования

Дифференциальный метод центрифугирования (Differential velocity centrifugation method) также известен как метод центробежного дифференциального разделения.

принцип дифференциальной центрифуги

Используя различия в коэффициентах оседания компонентов в образце, различные частицы подвергаются различным центробежным силам, после многократного центрифугирования, скорость центрифугирования постепенно увеличивается, различные частицы оседают в свою очередь, чтобы достичь центробежного разделения.

Принцип дифференциальной центрифуги может быть проиллюстрирован выражением центробежной силы: F = ma, где a = омега 2R.

Из - за малой массы мелких частиц центробежная сила, необходимая для разделения, велика. Для удовлетворения потребностей большой центробежной силы необходимо увеличить скорость ее вращения, прежде чем ее можно разделить. Разделение частиц различного размера различными центробежными силами является динамическим методом разделения, особенно для частиц с более различными скоростями осаждения.

Если в разделенных образцах присутствуют частицы трех разных размеров, больших, средних и малых, то они подвергаются различной центробежной силе, а частицы большого размера, имеющие большую массу, сначала оседают; Разделите очищающую жидкость, сделайте вторую центрифугу очищающей жидкости с большей скоростью вращения, и средние частицы будут отделены; Затем возьмите верхнюю очистку для большей центробежной силы, более высокой скорости вращения, после осаждения мелких частиц, чтобы достичь разделения различных частиц, как показано на рисунке 1.

Рисунок 1 Дифференциальная центрифуга

Поскольку в осадке каждой частицы всегда содержится часть вторичных частиц, для очистки частицы необходимо разбавить осадок частицы, а затем центробежно осадить, чтобы в конечном итоге получить частицу идеальной чистоты.

Преимущества дифференциальной центрифуги

Дифференциальная центрифуга в основном используется для разделения частиц с большими различиями в диаметре и плотности, преимущество заключается в коротком времени разделения, высокой повторяемости, большой обработке образцов, может использоваться для первоначального разделения большого количества образцов.

Однако при разделении сложных образцов методом дифференциальной центрифуги или при более высоких требованиях к чистоте разделения потребуется несколько центрифуг, сложные операции; Во - вторых, из - за многократной очистки, растворения и повторного осаждения осаждения, легко вызвать промежуточные потери, может вызвать проблему плохой разрешающей способности центрифуги; Кроме того, при фактическом разделении из - за конвекции при центрифуге, диффузии и загрязнения при осаждении при улавливании не может быть произведена отдельная очистка * некоторых компонентов с незначительными различиями в коэффициентах осаждения. Из - за ограничений дифференциального центрифугирования с точки зрения чистоты и скорости извлечения образцов, он в основном используется для предварительной сепарации и очистки большого количества образцов в рамках подготовки к следующим испытаниям или экспериментам.

Например, мы можем многократно проводить центробежный и осадочный / верхний сбор равномерного раствора тканей печени животных с различной относительной центробежной силой и временем, получать образцы первичного сепарационного обогащения ядра, митохондрий, лизосом и рибосомы и т. Д. Для других последующих тестов или экспериментов по тонкой очистке. Конкретные процессы обработки данных заключаются в следующем:

Центробежные классы в серии, продолжайте уделять внимание, чтобы узнать больше о центробежных методах!