NEB M0202S T4 ДНК - лигаза 20000U

Особенности

• Эффективное подключение к вязким концам и концам
• Т / А клонирование
· Реставрация DSDNA
• Создание высококачественной библиотеки клонов
Связь РНК и ДНК

NEB M0202S T4 ДНК - лигаза 20000U

Обзор

Этот фермент катализирует образование диэфирных связей фосфата на двух цепях ДНК или на соседних концах 5 '- фосфата и 3' - гидроксильных концах РНК. Этот фермент не только катализирует соединение между плоскими или вязкими концами, но и восстанавливает одноцепочечную резку в двухцепочечной ДНК, РНК или гибридной DNA / РНК.

источник

Очистить себяЕ. coliC600 pcl857 pPLc28 лиг8.

Условия реакции

1x T4 ДНК - лигазы реакция буфер
[50 мм Tris - HCl (pH 7.5 @ 25°C), 10 мм MgCl2, 10 мм DTT, 1 мм ATP]. * Концентрация на конце ДНК 5 'составляет 0,1 - 1,0 мкм при температуре 16°C.
Тепловая инактивация: 65°C 10 минут.

Определение единицы (вязкая конечная активная единица)

1 Единица относится к количеству ферментов, необходимых для соединения 50% обработанных Хиндом III фрагментов Лямбда ДНК [концентрация на 5 'концах 0,12 мкм (300 мкг / мл)] в течение 30 минут в 20 мкл 1x T4 DNA - реакционном буфере при температуре 16°C.

концентрация

400 000 units / ml и 2 000 000 units / ml.

Меры предосторожности

АЕ. coliВ отличие от ДНК - связывающих ферментов, требующих NAD + в качестве вспомогательного фактора, вспомогательным фактором T4 - ДНК - связывающих ферментов является ATP.

Разбавленная ДНК - лигаза T4 должна храниться в буфере хранения глицерина (разбавленный буфер A, NEB # B8001) при температуре 20°C, 50%. При использовании сразу после разбавления можно также разбавить реакционный буфер 1X T4 DNA.

При добавлении 1 мМ АТФ в реакционную систему соединительная реакция может быть получена в четырех ограниченных буферах эндокриноза, предоставляемых NEB или в

T4 ДНК полинуклеотидные киназы реагируют в буфере.

T4 ДНК - лигазы

Номер

спецификация

Цены

Пекинские запасы

Шанхайские запасы

#M0202L

100 000 единиц

есть

есть

#M0202M

(Высокая концентрация 5X) 100 000 units

есть

есть

#M0202S

20 000 единиц

есть

есть

#M0202T

(Высокая концентрация 5X) 20000 units

есть

есть

#M0202V

10 000 единиц

есть

есть