В сентябре 2018 года, используя MALDI - TOF, в Японии был выпущен в качестве стандарта (ISO) метод идентификации волос животных, который обнаруживает специфические полипептиды животных. Кроме того, он будет определен как японский промышленный стандарт (JIS). Даже с одним волоском анализ можно провести с помощью этого метода идентификации. Таким образом, можно не только предотвратить подделку кашемира, но и использовать для идентификации различных волос, таких как перья, человеческие волосы и пищевые продукты, смешанные с инородными веществами. Метод был разработан Институтом геномной биоинженерии Технологического университета Киндзава на основе системы MALDI - TOF.

Методы анализа волос животных играют важную роль во всех областях. Волосы животных используются для изготовления различных волокнистых изделий, таких как пальто, рубашка, свитер и т.д. При изготовлении таких волокнистых изделий существует обязательство по маркировке видов волокон и степени их смешивания при использовании различных волокон в соответствии с методом маркировки качества бытовых товаров. Кроме того, когда волосы смешиваются с пищей, определение типа волос имеет решающее значение для четкого пути смешивания.

Удаление влаги, около 90% волос состоит из белка. На рисунке 1 показана структура волос животных.

Рисунок 1 Схема волос животных

Волосы, защищая от внешних потрясений, также играют роль теплоизоляции, и эта функция тесно связана со структурой волос. Белки волос содержат большое количество стероидов, которые, связываясь стероидами, образуют несколько взаимосвязанных структур между молекулами. Химический анализ волос требует растворения с использованием вещества, называемого восстановителем, чтобы отрезать дисульфидные связи. Кроме того, полученный протеиновый экстракт содержит множество белков и солей, таких как, следовательно, необходимо очищать с помощью полиакриламида геля электрофореза (SDS - PAGE) и т.д. Процедура идентификации волокон MALDI - TOF для волос животных показана на рисунке 2:

Рисунок 2 Анализ шерсти животных MALDI - TOF MS

* Обработанный полипептидный анализ MALDI - TOF MS позволяет обнаружить кристаллические образцы на металлической мишени с помощью MALDI - TOF MS. Корректируйте мощность лазера и другие условия обнаружения, чтобы обеспечить хорошее разрешение в области наблюдения за пиком специфичности m / z2450 - 2750 для животных.

Тестирование MALDI - TOF MS проводилось с помощью * разрезанных образцов белковых полос SDS - PAGE. Найдите специфических пиковых представителей различных видов животных.

а)Полоса 1 КератинII (b) Полоса 2 КератинIII

Рисунок 3 Карта обнаружения MALDI - TOF MS

Используя технологию MALDI - TOF MS, можно найти различия между кашемиром, шерстью и волосами яка в пиковых интервалах m / z 2450 - 2750 и специфических пиковых значениях. Как показано на диаграмме 4.

Рисунок 4 Пиковые значения специфичности видов животных в MALDI - TOF MS

Таблица 1

* 1 Пик окраски является основным пиком

Анализ MS / MS на пики специфичности этих видов животных позволяет предположить, что аминокислоты расположены так, как показано в таблице 1 2). Пептиды, состоящие из 23 аминокислот, имеют 1 между кашемиром и шерстью и 4 аминокислоты между кашемиром и волосами яка.

Многие волокнистые продукты подвергаются химической обработке, такой как отбеливание, обесцвечивание, окрашивание и т. Д. В процессе обработки, но особое пиковое положение волос животных не меняется из - за этой обработки, поэтому ясно, что его можно использовать для идентификации видов волос животных в волокнистых продуктах.

Анализ волос.

Анализируя шерсть животных в волокнистых изделиях, чтобы избежать отклонений в составе продукта, можно взять широкий диапазон проб и усреднить продукт, а затем использовать часть из них. Поэтому микроанализ редко требуется. С другой стороны, при анализе волос, смешанных с пищей, рекомендуется использовать как можно меньше образцов для анализа.

В научных исследованиях анализ ДНК волос позволяет получить много информации, связанной с группой крови, которая может определить индивидуальные характеристики. Однако большинство волос животных, используемых в волокнистых изделиях, имеют только сухую часть волос, особенно сильно окрашенные продукты, и анализ ДНК затруднен. Анализ белка методом MALDI - TOF MS позволяет полностью обнаружить даже 1 волосок.

В зависимости от вида животных пиковое положение специфичности также варьируется, но у животных с одним и тем же свойством больше пиков в одном и том же месте. Такие, как кашемир и ангольская шерсть, должны быть идентифицированы с помощью микроскопа. В таблице 2 показано пиковое положение (m / z) основных пиков специфичности животных, а также расположение аминокислот, предположительно из базы данных. Основные пики бобров, лис и собак одинаковы, но второй пик, который можно увидеть у лис, - 2638, а у собак - 2641, что позволяет судить о них. В дополнение к животным, перечисленным здесь, животные, которые имеют доступ к геномным базам данных, также могут предполагать и подтверждать местоположение пиков специфичности. Таким образом, спектр m / z2450 - 2750 позволяет определить, какой тип волос содержится в животном, что является важной особенностью метода MALDI - TOF MS.

Рисунок 6 1 Волосы MALDI - TOF MS Анализ пиковых значений, характерных для видов животных

Таблица 2 Расположение аминокислот и пиковое положение пептидов, специфичных для волос животных (m / z)

* По данным NCBI ( https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ ) Презумпция

Ссылки:

Симадзу Applied News No. 65 и литература

1) Дацусинь I, Юйсян из деревни, Саяно Юаньчжао, SEN’I GAKKAISHI、68（10）、276 （2012）．

2) Такаси I, Юкио Кумура, Саоно Юаньчжао, Ичиро Ёсиока, SEN’I GAKKAISHI，70 (6)、114 (2014)．

ISO20418-2 Текстиль - Качественный и количественный протеомический анализ некоторых волокон волос животных - Часть 2: Выявление пептидов с помощью MALDI-TOF MS.